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当料温降至40°C时，移入接种袋或接种箱中，然后放入酒精、棉塞、包扎带、气雾消毒盒、火机、接种钩、菌种，菌种好用百菌清或5%水浸洗，同时有红、绿、黄等色杂菌的菌种，每四筒料放一包菌种。一切就绪后封闭接种箱，点燃消毒盒20分钟后可实现接种，接种时操作人员预先用75%酒精消毒双手，然后小心伸入接种箱中，从尾部撕开种袋接种，种头接近棉塞处的表皮种 弃之不用。地养室培养，此时培养室温度保持24~30°C,12小时后种子开始萌发吃料，20天后当菌丝长至筒料一半时，把接种端袋口稍稍打开通气培养，菌丝长满后，零星出现原基时，进入菌棚排场管理。
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加葡萄糖（处理③）。在基础配方中添加牛肉膏和蛋白胨后，虫草生长与只添加无机盐相比没有明显差别，推测牛肉膏和蛋白胨提供的主要营养物质———磷酸盐、碳源、氮源和维生素在磷酸二氢钾和硫酸镁存在的情况下已并非限制性因子，即达到了营养饱和。因此再添加并不能有促进生长作用，反而由于添加物质过多导致培养基缝隙过密，不利于出草。处理⑤和处理⑥的无机盐和葡萄糖添加量相等，但分别添加了牛肉膏和蛋白胨，虫草生长出现统计学差异，这可能是由于牛肉膏和蛋白胨分别添加导致培养基中C：N比例改变，牛肉膏中提供大量碳源，而蛋白胨提供大量氮源，而只有在合适的C：N前提下，虫草子实体才能正常生长[7]。在葡糖糖提供了足够碳源的基础上，培养基中添加蛋白胨更适合虫草生长。在大米培养基中只添加有机质（处理②），虫草的生长和只添加无机盐相当，因此，在实际生产中，性质稳定而价格较低的无机盐更为实用。
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